上海遠(yuǎn)慕生物科技是家專業(yè)供應(yīng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商，專業(yè)出售人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA檢測(cè)試劑盒，酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標(biāo)檢測(cè)試劑盒，染色試劑盒，生化試劑盒以及培養(yǎng)基，抗體，動(dòng)物血清，標(biāo)準(zhǔn)品，化學(xué)試劑，實(shí)驗(yàn)耗材，細(xì)胞株，其他實(shí)驗(yàn)試劑及實(shí)驗(yàn)品，ELISA種屬涵蓋了科研實(shí)驗(yàn)所需的動(dòng)植物，咨詢！

    中文名：人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA試劑盒

    別名：人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA Kit

    供貨商：上海遠(yuǎn)慕

    規(guī)格：48t/96t

    檢測(cè)范圍：人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊

    特異性：本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。

    檢測(cè)種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。

    適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床 。

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    ELISA的液體類標(biāo)本：

    包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

    1）血清：

    室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    2）血漿：

    應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    3）尿液：

    用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

    4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

    檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

    檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    5）組織標(biāo)本：

    切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。

    技術(shù)原理：

    1.抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

    2.結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。

    3.酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。

    4.受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

    5.此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

    6.加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。

    操作步驟：

    1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

    2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

    3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對(duì)照孔不加。

    4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

    5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板）。

    6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對(duì)照孔不加。

    7、溫育：重復(fù)4的操作。

    8、洗板：重復(fù)5的操作。

    9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。

    10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

    11、測(cè)定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值（OD值）。

    12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

    人熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)：

    1.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

    2.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

    3.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

    4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

    5.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

    6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

    7.加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

    8.按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

    9.底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

    人ELISA檢測(cè)試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：

    人血管生長(zhǎng)素（ANG）ELISA試劑盒

    人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子（KAF）/雙調(diào)蛋白（AR）ELISA試劑盒

    人血管緊張素Ⅱ（ANG-Ⅱ）ELISA試劑盒

    人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）ELISA試劑盒

    人環(huán)磷酸腺苷（cAMP）ELISA試劑盒

    人白細(xì)胞活化黏附因子（ALCAM）ELISA試劑盒

    人活化素A（Activin-A）ELISA試劑盒

    CAS：509-15-9 鉤吻素甲；鉤吻堿

    人凋亡相關(guān)因子（FAS/CD95）ELISA試劑盒

    人E選擇素（E-Selectin/CD62E）ELISA試劑盒

    人紅細(xì)胞生成素（EPO）ELISA試劑盒

    人紅細(xì)胞生成素受體（EPOR）ELISA試劑盒

    豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）ELISA試劑盒

    人α2抗纖溶酶（α2-AP）ELISA試劑盒

    人α2纖溶酶抑制物（α2-PI）ELISA試劑盒

    豬腸三葉因子（ITF）ELISA試劑盒