瑞氏染色法的染色原理
物理吸附與化學(xué)親和作用
嗜酸性物質(zhì)→伊紅+ Hb、嗜酸性顆粒
嗜堿性物質(zhì)→亞ya甲藍+ 細胞核蛋白、L及B胞質(zhì)
瑞氏染色法的注意事項
①選用的玻片應(yīng)潔凈干爽、無污物潮濕 ,否則 ,有可能出現(xiàn)血片不潔、血細胞被玻片上的雜物損壞、以及 “潮濕"使血細胞著色產(chǎn)生偏差等不 良后果。
②血膜厚薄要適宜 ,太厚或太薄均不好 ,太厚不僅容易造成血細胞過多過密 、血膜片濃染 。而日常會使部分 血細胞濃縮變小 、形態(tài)不佳 。太薄 ,血片的血細胞偏少 ,用于教學(xué)不理想 。每張血片的采血量約半粒黃豆大小為宜。推血片時,推片與血膜片約呈 45。夾角 ,這樣制成的血膜的厚薄較為合適。
③剛推好的、血液未干的血膜片要水平放置晾干。若此時直立放置 ,血液就會向下流動,很多血細胞就會跑到血液流向方血膜片一側(cè)的邊上 ,以至血膜片中央大部分 的血細胞數(shù)量相對減少。
④染色前 ,用甲醇將血膜片固定 ,能更好地保存血細胞的完好和完整,避免其變形、收縮和破碎 。
⑤注意制作方法中的三處 “晾干",否則 ,可能會產(chǎn)生血細胞著色不良、染色效果不好以及血片質(zhì)量不佳等結(jié)果。
簡易步驟:
1、 取病料涂片、自然干燥
2、 滴加瑞氏染液染3分鐘,使標(biāo)本被其中甲醛所固定;
3、 加等量PH6.4的磷酸鹽緩沖液(或等量超純水)輕輕晃動玻片,均勻靜置5分鐘;
4、 水洗、吸干、鏡檢。
5、 細菌染成藍色,組織細胞胞漿紅色,細胞核藍色或紫色。