實(shí)驗(yàn)室常用細(xì)胞簡(jiǎn)介，有助于了解基本的細(xì)胞信息，非常有用！

    一、CHO-K1細(xì)胞

    CHO-K1細(xì)胞是實(shí)驗(yàn)中非常常用的一個(gè)細(xì)胞株，在生物制藥中使用也非常廣泛。該細(xì)胞株培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單，貼壁強(qiáng)度適中，比較容易轉(zhuǎn)染，很適合用它來研究一般哺乳動(dòng)物基因的功能。

    來源：Cricetulus griseus (中國(guó)倉(cāng)鼠) 卵巢 

    形態(tài)：表皮細(xì)胞 

    生長(zhǎng)特性：貼壁

    注釋：CHO-K1由CHO衍生而來，CHO是T. T. Puck 在1957年從一只成年中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢獲得的。

    培養(yǎng)液：Ham's F12K （含2 mM L-谷氨酰胺，1.5 g/L NaHCO3）， 10% 胎牛血清。

    傳代：吸去培養(yǎng)液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會(huì)抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘，直到細(xì)胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液，用移液器把細(xì)胞吹散。加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。（以1：4到1：8為宜，傳代期間培養(yǎng)液更換1-2次）

    凍存：95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。

    二、293細(xì)胞

    293細(xì)胞比較容易轉(zhuǎn)染，是一個(gè)很常用的表達(dá)研究外源基因的細(xì)胞株。293細(xì)胞的一個(gè)衍生株：293T/17的轉(zhuǎn)染效率更高，成為廣大研究者研究基因功能的一個(gè)強(qiáng)大工具。

    293細(xì)胞的缺陷是生長(zhǎng)過程中貼壁強(qiáng)度比較小。所以在實(shí)驗(yàn)過程中容易流失，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)室新得到的293細(xì)胞是郵寄得到的并且細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中，就需要讓細(xì)胞沉降幾天時(shí)間，因?yàn)榇罅考?xì)胞會(huì)漂浮在培養(yǎng)液里。

    來源：人體腎臟

    形態(tài)：上皮細(xì)胞 

    生長(zhǎng)特性：貼壁 

    注釋：該細(xì)胞含腺病毒5 DNA 。

    培養(yǎng)液： MEM（ 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉）， 10% 馬血清（熱滅活）。

    傳代： 吸去培養(yǎng)液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會(huì)抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘，直到細(xì)胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液，用移液器把細(xì)胞吹散。加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。（以1：2到1：4為宜，傳代期間培養(yǎng)液2-3天更換1次）

    凍存：95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。

    三、vero細(xì)胞

    Vero細(xì)胞被成功的用來培養(yǎng)狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗，在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻(xiàn)，在醫(yī)藥研究中廣泛應(yīng)用。

    來源： 非洲綠猴腎細(xì)胞 

    形態(tài)：上皮細(xì)胞 

    生長(zhǎng)特性：貼壁

    注釋：該細(xì)胞是日本千葉大學(xué)的Y. Yasumura和Y. Kawakita于1962年3月27日從一只正常的成年非洲綠猴腎組織培養(yǎng)出來的。

培養(yǎng)液：MEM（ 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉）， 10%胎牛血清

    傳代：吸去培養(yǎng)液。用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會(huì)抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘，直到細(xì)胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液，用移液器把細(xì)胞吹散。加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。（以1:3至1:6為宜，傳代期間培養(yǎng)液每周更換2-3次）

    凍存： 95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。

    四、NIH-3T3細(xì)胞

    NIH-3T3細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)室常用來做轉(zhuǎn)染及基因表達(dá)的研究。易感病毒有鼠肉瘤病毒和鼠白血病毒。

    來源： Mus musculus（小家鼠）胚胎 

    形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣 

    生長(zhǎng)特性：貼壁

    注釋：為得到適合轉(zhuǎn)染得細(xì)胞株，NIH-3T3細(xì)胞至少連續(xù)克隆過5次。NIH-3T3細(xì)胞容易轉(zhuǎn)染DNA，鼠痘病毒陰性。

    培養(yǎng)液：DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、4.5g/L葡萄糖、1.5g/L碳酸氫鈉），10%小牛血清

    傳代：吸去培養(yǎng)液。（不要讓細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)器皿，長(zhǎng)滿80%為宜）用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會(huì)抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘，直到細(xì)胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液，用移液器把細(xì)胞吹散。加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。（以3-5x103/cm2為宜，傳代期間培養(yǎng)液每周更換2次）

    凍存： 95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。