蛋白質(zhì)沉淀方法之有機(jī)溶劑沉淀法
點(diǎn)擊次數(shù):104 更新時(shí)間:2024-11-28
有機(jī)溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產(chǎn)品的分離純化
有機(jī)溶劑的沉淀機(jī)理是降低水的介電常數(shù),導(dǎo)致具有表面水層的生物大分子脫水,相互聚集,最后析出。
該法優(yōu)點(diǎn)在于:
1)分辨能力比鹽析法高,即蛋白質(zhì)或其它溶劑只在一個(gè)比較窄的有機(jī)溶劑濃度下沉淀;
2)沉淀不用脫鹽,過濾較為容易;
3)在生化制備中應(yīng)用比鹽析法廣泛。
但是,在常溫下,有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性。例如酒精消毒滅菌就是如此。因此,操作要求在低溫下進(jìn)行。有機(jī)溶劑的選擇首先是能和水混溶,使用較多的有機(jī)溶劑是乙醇、甲醇、丙酮,還有二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等。